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  • 解决方案

    酶制剂中酶活检测方法包括:

    还原法:酶与底物在特定的条件下反应,在此反应体系中添加化学试剂,酶促反应的产物可与该化学试剂发生反应,生成有色物质。通过在特定的波长下 比色,求出还原产物的含量,从而计算出酶活力的大小 。

    色原底物法:通过底物与特定的可溶性生色基团物质结合,合成人工底物。该底物与酶发生反应后释放生色基团,用分光光度法测定颜色的深浅,在与已知标准酶所做的曲线比较后,即可求出待测酶的活力。

    粘度法:该法常用于测定纤维素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶的活力。当酶作用于粘性底物时会使其粘度大为降低。测定一定条件下溶剂和样品溶液的运动粘度,便可计算特性粘数,并以此来判断酶的活力。

    高效液相色谱法:酶与其底物在特定的条件下充分反应后,从反应体系中提取溶液进行色谱分析,测量各个样的峰高和半峰高,计算出酶促反应生成物的含量,从而换算出酶活力的数值。

    免疫学方法:根据酶与其抗体之间可发生特定的沉淀反应,通过待测酶和标准酶的比较,最终确定酶活力。

    琼脂凝胶扩散法:将酶作用的底物与琼脂混合熔融后,制成琼脂平板。用打孔器在琼脂平面上打出一个约4-5mm半径 的小孔。在点加酶样并培养24h以后,用染色剂显色或用展开剂展开显出水解区,利用水解直径和酶活力关系测定酶活力。

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